近年来，随着药物开发研究工作的不断发展，圆二色谱（Circular Dichroism，CD）分析已经成为蛋白质和多肽类生物制品开发研究中不可或缺的重要工具之一。圆二色谱仪利用蛋白质的圆二色性以及对左右圆偏振光吸收的不对称性进行结构分析。蛋白质或多肽中的主要光活性基团包括肽键、芳香氨基酸残基和二硫键等。当平面圆偏振光的吸收不对称时，就会产生吸收差值，这种差异引起偏振光矢量的振幅差，使圆偏振光变成了椭圆偏振光，这就是蛋白质的圆二色性。通过使用圆二色谱扫描仪测量蛋白质等生物大分子的圆二色光谱，可以简单而快速地鉴定生物大分子的二级结构，广泛应用于蛋白质折叠、构象研究和酶动力学等领域。

百泰派克生物科技有限公司BTP基于Jasco圆二色谱仪建立圆二色谱分析平台，用于研究蛋白和多肽类生物制品的二级结构。仪器配备的温控和滴度模块可以进一步研究温度、pH值、离子强度等因素对于蛋白折叠状态和稳定性的影响。

圆二色谱技术

圆二色谱是应用最为广泛的蛋白质二级结构测定方法，也是研究稀溶液中蛋白质构象的一种快速、简单且相对准确的方法。它可以在溶液状态下进行测定，更贴近蛋白质的生理状态。圆二色谱测定方法快速简便，对构象变化灵敏，因此成为研究蛋白质二级结构的主要工具之一，并在蛋白质构象研究领域得到广泛应用。

实验仪器

圆二色谱仪（Jasco）•

应用

•推断物质的构型和构象

•蛋白质/多肽等生物制品的二级结构和高级结构信息分析

案例示意图

样品离心后取澄清溶液部分，上机检测。

远紫外检测参数：

起始波长(Begin)190 nm,

终止波长(End)260 nm,

步长(Step)1 nm, 重复(Repeat)1次,

采集时间(Acquisition period) 1 s/点，

比色皿宽度0.1 cm。

得到如下结果：

常见问题：

问题1：圆二色谱在近紫外区和远紫外区扫描到的图谱代表什么？

回答：圆二色谱在远紫外区的扫描图谱提供了蛋白质二级结构的信息。它反映了蛋白质中肽键的空间排布，通过计算可以得到不同二级结构元件（如α-螺旋、β-折叠、转角和不规则卷曲）在蛋白质中的比例。这些信息对于了解蛋白质的结构特征和稳定性非常重要。

圆二色谱在近紫外区的扫描图谱则提供了关于蛋白质侧链的信息。它反映了蛋白质中含有生色基团的氨基酸残基（如色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸）在空间中的排布情况。同时，近紫外区扫描还可以揭示蛋白质中二硫键的微环境变化。这些信息对于研究蛋白质的功能和相互作用具有重要意义。

问题2：使用什么软件分析蛋白质的二级结构，有何优势？

回答：目前有多种软件可用于蛋白质二级结构的分析和预测。BTP采用CDNN软件进行分析。CDNN是一种基于深度神经网络技术的二级结构计算软件，它能够通过分析蛋白质的氨基酸序列来预测其二级结构组成。相比其他软件，CDNN具有以下优势：首先，它提供了高准确性的计算结果，能够准确预测蛋白质的二级结构。其次，CDNN具有高速度的计算能力，能够快速处理大规模的蛋白质序列数据。此外，CDNN还具有经济性，可以节省分析成本和时间。该软件已在许多生物医学应用中得到验证和应用，例如药物设计和蛋白质结构预测等。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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