免疫组化(IHC)检测
原理和过程:石蜡切片复水后,抗原修复,孵育特异性一抗,生物素标记的二抗,HRP标记的结合素,最终DAB显色,苏木素复染,封片,照相。应用:待检蛋白质分子在组织上进行定位,定量分析,以及通过标志分子确
质粒转染表达检测(WB)
融合tag(如flag等)或marker基因(如GFP)的外源基因真核表达质粒转染目的细胞(如293T细胞)后,继续培养一定时间,之后收集细胞提取总蛋白,Western Blot方法检测外源基因的表达
Western Blot
从细胞、人或动物组织、细菌、植物、血清等样品中提取蛋白,对蛋白进行定性及定量分析,聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品,湿法转印,用抗体鉴定膜上的特定蛋白,胶片曝光,软件分析。